4种莪术有效成分对肝星状细胞-T6基因表达的影响

目的:研究莪术4种有效成分(莪术油、莪术醇、β-榄香烯、姜黄素)对肝星状细胞-T6(HSC-T6)基因表达的影响.方法:从基因库中查询50种肝纤维化相关基因的mRNA序列,用寡核苷酸探针设计软件设计探针,在PE8909DNA合成仪上合成寡核苷酸,用OGR-04点样仪及醛基化玻片制备成基因芯片.以秋水仙碱、莪术油、莪术醇、β-榄香烯、姜黄素不同浓度含药培养液培养HSC-T6细胞.根据细胞毒性实验,确定细胞存活率在50%以上的药物浓度作为实验所用浓度,每组设空白对照组,分别按1、6、12和24 h 4个时间段收集细胞.按操作步骤提取细胞总RNA,经逆转录荧光标记、杂交和洗涤,用Genepix 4000B扫描仪扫描芯片和Ima Gene 4.2软件进行数据分析并归一化处理,使用看家基因和阳性对照对Cy3和Cy5扫描结果进行校正.结果:秋水仙碱6.25 μg/ml作用HSC-T6细胞12 h,可使基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)表达下调220%;莪术油78.125 μg/ml作用HSC-T6细胞24 h,可使基因TIMP2、白细胞介素-6表达分别下调230%和220%;莪术醇1.562 5 μg/ml作用HSC-T6细胞12 h,可使转化生长因子-β1、P450a基因表达下调230%和210%.结论:本研究从分子水平揭示了莪术有效成分莪术油、莪术醇的抗肝纤维化机制.