慢病毒介导的ROBO1沉默抑制乳腺癌细胞生长克隆及ATP合成

目的 研究沉默ROBO1对乳腺癌细胞生长、克隆及三磷酸腺苷(ATP)合成的影响.方法 乳腺癌细胞MDA-MB-231感染ROBO1 siRNA重组病毒和siRNA control重组病毒记为干扰组和阴性组,以不做处理的细胞作为对照组.qRT-PCR和Western blot检测细胞中ROBO1 mRNA和蛋白水平,以MTT法检测细胞增殖情况,克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,荧光素酶法检测细胞合成的ATP水平,流式细胞术检测细胞周期,Western blot检测细胞中周期蛋白D1(CyclinD1)、p21蛋白水平.结果 阴性组细胞中ROBO1 mRNA和蛋白水平、细胞OD值、克隆形成率、ATP水平、细胞周期比率及cyclinD1、p21蛋白水平与对照组比较,差异均无统计学意义(P ＞0.05).干扰组细胞中ROBO1 mRNA和蛋白水平降低,细胞OD值也降低,克隆形成率及ATP水平下降,G0/G1期细胞比率升高,细胞中cyclinD1蛋白水平降低,p21蛋白水平升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P ＜0.05).结论 沉默ROBO1抑制乳腺癌细胞的生长、克隆及ATP合成能力,并且能将细胞周期阻滞在G0/G1期.