MALDI-TOFMS快速鉴定耐万古霉素屎肠球菌及其流行病学分型性能分析

目的 利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)快速鉴别van A型万古霉素耐药屎肠球菌(VREfm)和万古霉素敏感屎肠球菌(VSEfm),并对VREfm进行流行病学相关性分析.方法 收集139株屎肠球菌临床分离株,其中VREfm66株、VSEfm73株.采用聚合酶链反应(PCR)确定66株VREfm的万古霉素耐药基因.采用MALDI-TOF MS鉴定屎肠球菌.随机选取45株VREfm和50株VSEfm,采用ClinProTools 3.0软件对质谱峰进行分析并建立模型,用最佳模型验证另外的21株VREfm和23株VSEfm.随机选取21株VREfm进行多位点序列分型(MLST)分析,并采用MALDI-TOF MS对其进行层次聚类分析.结果 MALDI-TOF MS鉴定出所有菌株均为屎肠球菌,鉴定分值为2.321～2.602.66株VREfm均为vanA基因型.采用ClinProTools 3.0软件建立的最佳模型进行外部验证时,敏感性和特异性分别为95.2％和95.7％.21株VREfm共有7种序列分型(ST)型别,以ST78最常见.MALDI-TOF MS将21株VREfm分为4个集群,绝大多数ST78菌株被归于同一集群,与ST78高度相关的其他ST型别也被归于此集群.结论 在严格控制实验条件的前提下,MALDI-TOF MS可快速区分vanA型VREfm和VSEfm,但无法区分与VREfm高度相关的ST型别.