干扰素-λ1/白介素-29抑制脓毒症患者血清C5a诱导的中性粒细胞胞外诱捕网相关的凝血酶生成

目的 探讨脓毒症血栓形成的炎症环境中血清来源C5a补体能否激活多型核中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophils,PMNs)释放中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs),以及干扰素-λ1/白介素29(interferon-λ1/interleukin 29,IFN-λ1/IL-29)是否具有抑制NETs相关凝血酶生成的作用.方法 健康志愿者和脓毒症患者的外周血样分别来自2018-2019年苏州大学附属第二医院门诊和住院部,体外研究脓毒症患者血清C5a刺激的健康志愿者外周血分离的PMNs细胞,IL-29和抗CD88单抗作为NETs释放调节因子,免疫荧光分析(immunofluorescence,IF)PMNs上NETs的释放水平,免疫印迹技术(immuno blot,IB)评估PMNs上组织因子(tissue factor,TF)的表达,荧光光谱法(fluorescence spectroscopy,FS)测定上清液中循环DNA水平,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定凝血酶-抗凝血酶(thrombin-antithrombin,TAT)复合物水平.计量资料多组间比较采用单因素方差分析,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 以脓毒症患者血清C5a诱导的健康志愿者PMNs释放的NETs表达水平(20.5±3.7)％为对照组,IL-29和抗CD88单抗抑制了脓毒症患者血清C5a诱导的健康志愿者PMNs上TF表达的NETs释放,采用IF技术测定的表达水平分别为(5.0±1.5)％、(7.3±3.1)％,差异均有统计学意义(q=9.23和8.73,均P＜0.01).IL-29和抗CD88单抗抑制了脓毒症患者血清C5a诱导的健康志愿者PMNs上TF水平,IB测定的TF表达水平分别为(0.52±0.03)％、(0.57±0.02)％,与脓毒症患者血清C5a诱导的健康志愿者PMNs的TF表达水平(0.81±0.03)％进行比较,差异均有统计学意义(q=3.44和3.21,均P＜0.05).IL-29和抗CD88单抗降低了NETs相关的TAT复合物的水平,分别为(3.3±0.4) ng/mL、(4.6±0.7)ng/mL,与脓毒症患者血清C5a诱导的健康志愿者PMNs释放的NETs相关的TAT复合物水平(7.8±0.7) ng/mL比较,差异均有统计学意义(q=6.77和5.27,均P＜0.01).结论 脓毒症患者血清来源的C5a诱导健康志愿者PMNs内TF的累积和表达TF的NETs释放,血清C5a促进了NETs依赖性凝血酶的生成.IL-29具有抑制C5a诱导的NETs释放及其相关的凝血酶生成.