固相萃取 Folin－Ciocalteu 比色法测定尿液中总酚含量

目的：建立 Folin－Ciocalteu 比色法测定尿液中总酚的方法。方法方法学建立。2013年12月至2014年4月选取北京医院123名健康志愿者，年龄18～81岁，男52名，女71名。尿液样本收集后加入终浓度0．5％ HCl，分装，－80℃保存；尿样用Plexa PAX固相萃取柱进行提取纯化、洗脱液用氮气吹干后重组；Folin－Ciocalteu试剂显色，紫外分光光度计测定吸光度；没食子酸标准曲线计算尿总酚浓度，结果用尿肌酐进行校正。测定尿总酚浓度，分析总酚与血脂等心血管病危险因素的关系。相关性比较采用Spearman相关性分析。结果没食子酸标准溶液和尿液样本在0．5％HCl、避光条件下在室温可稳定48 h、4℃稳定7 d。 Plexa PAX固相萃取柱对主要的多酚类物质有较好的回收率，并能有效去除维生素C、有机酸等物质的干扰。 PAX抽提、Folin－Ciocalteu比色法测定尿液中总酚的平均批内变异和总变异分别为2．7％～3．8％和2．4％～4．6％。123名健康志愿者尿液中总酚浓度为114．13（82．97～146．70） mg GAE／g Crea。尿总酚与HDL－C（r＝0．194， P＝0．032）和apoAI（r＝0．312，P＜0．001）呈正相关，与血尿酸（r＝－0．220，P＝0．014）呈负相关。结论成功建立了Folin－Ciocalteu比色法测定尿液中总酚的方法，方法精密、可靠，可用于评价多酚类物质的摄入水平。（中华检验医学杂志，2015，38：178－182）