广州地区儿童分离株青霉素耐药肺炎链球菌青霉素结合蛋白基因分型

目的 了解广州地区儿童分离株青霉素耐药肺炎链球菌(PNSP)的分子流行病学,为肺炎链球菌感染性疾病防控提供实验依据.方法 设计特异性引物,PCR扩增PNSP青霉素结合蛋白基因PBP1A、PBP1B、PBP2A、PBP2B、PBP2X、PBP3,进行测序分析.并使用Hinf I对PCR产物进行酶切,分析其限制性片段性长度多态性(RFLP).结果 成功提取PNSP的DNA、PCR结果显示:50株耐青霉素肺炎链球菌中:含PBP1A、PBP1B、PBP2A、PBP2B、PBP2X及PBP3的菌株阳性率分别为48.9%、64.4%、71.1%、31.1%、40.0%、31.1%.测序显示,它们与GenBank已知序列的同源性分别为99%、98%、100%、97%、95%、100%.使用Hinf I的RFLP分析显示: PBP1A、PBP1B、PBP2A、PBP3仅有一种基因型;PBP2B、PBP2X有两种基因型的,阳性率分别为71.4%、 28.6%、 66.7%、33.3%.结论 广州肺炎链球菌儿童分离株耐青霉素基因的分布以PBP2A、PBP1B、PBP1A为主.使用Hinf I酶切,PBP2B、PBP2X具有两种基因型,其中优势型均大于65%.