RPB5介导蛋白与HBx蛋白共表达对肝癌HepG2细胞凋亡的影响

目的 通过乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)与RPB5介导蛋白(RMP)在肝癌HepG2细胞中的共表达,探索RMP与HBx对肝癌细胞凋亡的影响.方法 脂质体介导瞬时转染细胞;实时荧光定量RT-PCR和western blot分别检测RMP与HBx在肝癌HepG2细胞中的表达量;流式细胞仪检测细胞凋亡率;逆转录PCR检测细胞凋亡相关基因Bax、Caspase3、P53、Bcl-2 mRNA相对表达水平,western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达.结果 与未经任何处理的HepG2细胞比较,转染RMP质粒的稳定表达HBx的HepG2细胞中RMP、HBx在基因及蛋白质水平表达均显著升高(P＜0.01);细胞凋亡率显著降低;促凋亡基因Bax、Caspase3和P53 mRNA相对表达水平均显著下调(P＜0.01),凋亡抑制基因Bcl-2 mRNA相对表达水平显著上调(P＜0.01);促凋亡蛋白Bax表达量明显降低,抗凋亡蛋白Bcl-2表达量明显升高.结论 RMP与HBx共表达可降低肝癌HepG2细胞凋亡率,提示RMP和HBx可能在肝癌发生和发展过程中起着重要的作用.