醌型二氢生物喋呤还原酶基因表达变化对高糖环境下NRK-52E细胞葡萄糖调节蛋白75表达的影响

目的 探讨醌型二氢生物喋呤还原酶(QDPR)基因对高糖环境下肾小管上皮细胞系NRK-52E葡萄糖调节蛋白75(GRP75)的影响及其在DN中的可能作用机制.方法 构建过表达及敲低QDPR基因的NRK-52E模型,分别予5.4 mmol/L和30 mmol/L葡萄糖培养基培养,Western blot检测GRP75在OLETF大鼠肾皮质及细胞模型各组的表达水平,流式细胞术检测细胞周期.结果 与LETO鼠比较,OLETF大鼠肾皮质GRP75含量降低[(1.53±0.27) vs (0.79±0.26),P＜0.01];与NRK-52E组比较,NRK-52E高糖组的GRP75含量降低[(0.62±0.03 ) vs (0.46±0.06)]、G0/G1期细胞增多[(39.80±1.31)% vs (50.35±0.33)%]、S期细胞减少[(48.55±1.85)% vs (37.17±0.10)%] (P＜0.05);过表达QDPR使高糖环境下GRP75含量降低[(0.85±0.10) vs (0.45±0.16),P＜0.05]、G0/G1期细胞增多[(43.73±0.48)% vs (61.87±0.17)%,P＜0.01],S期细胞减少[(42.42±0.66)% vs (25.29±0.12)%,P＜0.01];敲低QDPR不影响GRP75表达量与细胞周期. 结论 GRP75在DN模型中含量减少,QDPR基因可能通过GRP75及细胞周期影响DN发生发展.