PTEN在CCl4诱导肝纤维化大鼠模型中的作用及益气活血方对其的影响

目的 探讨第10号染色体缺失性磷酸酶张力蛋白同原物基因 (PTEN) 在CCl4诱导肝纤维化大鼠模型中的作用,阐明益气活血方调节PTEN阻止肝纤维化的分子机制.方法 选用27只Wistar雄性大鼠,随机分为3组,每组9只.其中肝纤维化组以CCl4诱导建立肝纤维化模型;益气活血方组在CCl4造模同时自拟以黄芪、丹参、云苓等中药为主的益气活血方进行干预实验;对照组以橄榄油腹腔注射.HE染色、Masson染色及胶原 (Col1A1和Col4) 免疫组化染色观察不同组别大鼠肝纤维化及胶原沉积程度;qRT-PCR、免疫组化及Western Blot检测TGFβ1、PTEN及其下游基因AKT、mTOR及p70S6K表达.计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验.结果 肝纤维化组大鼠肝组织病理学可见窦周纤维化、汇管区纤维组织增生及胶原沉积、纤维间隔形成,伴随促肝纤维化基因TGFβ1 mRNA及蛋白表达上调,PTEN表达下调,而PTEN下游信号因子AKT、mTOR、p70S6K mRNA及磷酸化蛋白表达上调,与对照组比较差异均有统计学意义 (P值均＜0.01).应用益气活血方组大鼠肝纤维化显著改善,PTEN表达较肝纤维化组明显增加 (P＜0.01),TGFβ1 mRNA及蛋白表达明显抑制 (P值均＜0.05),AKT、mTOR及p70S6K的mRNA及磷酸化蛋白表达较肝纤维化组明显减少 (P值均＜0.05).结论 益气活血方可能通过调节PTEN及其下游信号因子的表达,阻止及逆转肝纤维化.