稳定转染hSOD1-G93 A基因的肌萎缩侧索硬化细胞模型的建立

目的：建立稳定转染hSOD1-G93A真核表达载体肌萎缩侧索硬化细胞模型。方法进行NSC-34细胞的培养，利用脂质体方法把已经构建好的pcDNA3.1（－）、hSOD1-WT-pcDNA3.1（－）和hSOD1-G93A-pcDNA3.1（－）质粒转染至NSC-34细胞系中，再通过 G418筛选建立稳定表达hSOD1基因的NSC-34细胞系；以RT-PCR法鉴定转染后hSOD1在NSC34细胞系中的表达。结果转染 hSOD1-G93A-pcDNA3.1（－）质粒的细胞与正常NSC-34细胞相比，胞体变圆，突起减少，且轴突变短。而转染pcDNA3.1（－）和hSOD1-WT-pcDNA3.1（－）质粒的细胞较正常NSC-34细胞无明显变化。 RT-PCR法鉴定结果显示，转染hSOD1-WT-pcDNA3.1（－）和hSOD1-G93A-pcDNA3.1（－）质粒的细胞中 hSOD1基因表达为阳性，而正常 NSC-34细胞和转染pcDNA3.1（－）质粒的对照组为阴性。结论成功获得可稳定表达hSOD1-G93A基因的肌萎缩侧索硬化细胞模型。