miR-200c靶向ZEB1/ZEB2增加胃癌曲妥珠单抗化疗敏感性的作用机制研究

[目的]探讨微小RNA-200c(miR-200c)靶向ZEB1/ZEB2增加胃癌曲妥珠单抗化疗敏感性的作用机制.[方法]体外培养人胃癌细胞NCI-N87细胞,诱导曲妥珠单抗耐药细胞株(NCI-N87/TR),检测不同状态下细胞中miR-200c mRNA表达,用不同浓度的曲妥珠单抗进行干预,检测细胞增殖率,计算半数抑制浓度(IC50),同时检测伤口愈合率和侵袭细胞数,测定ZEB1、ZEB2、N-cadherin和E-cadherin蛋白的表达水平.[结果]NCI-N87/TR细胞中miR-200cmRNA的表达水平较NCI-N87细胞降低,NCI-N87/TR细胞转染miR-200c mimic后可以显著提高NCI-N87/TR细胞中miR-200c mRNA的表达水平,差异有统计学意义(P＜0.05).在0～400 μg/mL浓度范围内,曲妥珠单抗对NCI-N87细胞的增殖均有抑制作用,NCI-N87/TR细胞对曲妥珠单抗的敏感性降低.NCI-N87细胞、NCI-N87/TR细胞、NC对照组和miR-200c mimic组的IC50分别为8.64 μg/mL、244.64 μg/mL、237.84 μg/mL和14.67 μg/mL,转染miR-200c mimic增加了NCI-N87/TR细胞对曲妥珠单抗的敏感性.与NC对照组比较,miR-200cmimic组NCI-N87/TR细胞伤口愈合率、侵袭细胞数和ZEB1、ZEB2、N-cadherin蛋白表达水平显著降低,E-cadherin蛋白表达水平显著增加,差异有统计学意义(P＜0.05).[结论]ZEB1/ZEB2在胃癌NCI-N87/TR细胞曲妥珠单抗耐药过程中发挥重要作用,而miR-200c过度会使ZEB1/ZEB2的表达增加,增加NCI-N87/TR细胞对曲妥珠单抗的敏感性.