MicroRNA-218下调肝细胞癌中的 E2F2基因表达抑制细胞增殖的研究

目的：探讨 MicroRNA-218（miRNA-218）下调肝细胞癌中的 E2F2基因表达，从而抑制细胞增殖的机制。方法从细胞库中取得人类肝癌细胞株 HepG2、Huh7、MHCC-97H、BEL-7402和正常肝细胞株 L02。随后进行细胞培养和转移、反转录多聚酶链反应、免疫印迹分析、细胞增殖和集落形成试验、细胞周期分析和相应的统计学处理。结果 miR-218表达水平在癌细胞中下调。MTT 生长曲线表明，当 miR-218过度表达时（Huh7中的 miR-218 P ＝0．001；在 MHCC-97中的 miR-218 P ＝0．013）细胞增殖能力明显降低。双荧光素酶实验证实，转染了 miRNA-218模拟物的细胞的荧光素酶活性显著降低（P ＜0．01），荧光酶报告基因含有 E2F2野生型的第3′非翻译区。这些结果表明 E2F2是 miR-218的直接作用对象。与阴性对照组相比，转染了 miR-218模拟物的 Huh7和 MHCC-97细胞株中的 E2F2的相对 mRNA 表达显著下调（P ＜0．05）。结论 miR-218通过直接作用于 E2F2基因的第3′非翻译区调节 E2F2的表达，从而抑制 HCC 细胞增殖。