弓形虫Chinese 1基因型Wh6弱毒株感染小鼠抗强毒株致死性感染的免疫保护作用

目的 研究我国流行的优势基因型Chinese 1弱毒Wh6株感染抗致死性强毒Wh3株攻击感染的保护力,探讨其潜在的制备减毒活疫苗的价值.方法 将30只BALB/c雌性小鼠随机分为3组(Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ组),每组10只.取弱毒株弓形虫保种小鼠脑组织,分离包囊,计数.Ⅰ组小鼠灌胃包囊25-35个;Ⅱ组给与PBS对照;Ⅲ组正常小鼠不予任何干预.35 d后,Ⅰ组感染小鼠脑组织压片镜检,查见典型弓形虫包囊,表明慢性弓形虫感染BALB/c小鼠模型建立成功.分别取Wh3株速殖子(3 000个),腹腔感染Ⅰ组和Ⅱ组小鼠,观察小鼠存活及腹腔虫荷;同时剖杀小鼠,收集脾细胞培养上清,采用流式细胞术、荧光定量PCR、酶联免疫吸附试验等检测脾细胞中的Th1、Th2细胞因子水平.结果 Ⅱ组对照鼠在感染Wh3株弓形虫速殖子后第7d内死亡5只,第8d剩余5只全部死亡,随机取3只死亡小鼠对其腹腔进行计数,计数结果为(1.28±0.035 1)×106/mL;而Ⅰ组小鼠截止实验结束全部存活(P＜0.01).Ⅱ组鼠脾细胞培养上清Th1细胞因子IFN-γ、IL-12和Th2细胞因子IL-10水平相比Ⅰ组显著升高(P＜0.001).其中Th1细胞因子升高程度明显高于Th2细胞因子,巨噬细胞向Th1方向极化.结论 用弱毒株Wh6包囊攻击感染BALB/c鼠,可诱导强力的抵抗Wh3强毒株致死性感染的免疫保护力.Chinese 1基因型Wh6株具有候选减毒活虫疫苗研究的潜在价值.