RhoA因子在单增李斯特菌侵袭HepG2细胞中的作用

目的 研究HepG2细胞的Rho家族RhoA因子在Lm侵袭中的作用.方法 构建真核表达载体p3×FLAG-Myc-CMV-24-RhoA,经脂质体法转染HepG2细胞,使HepG2细胞过表达RhoA;同时针对RhoA序列合成siRNA,脂质体法转染HepG2细胞,抑制HepG2细胞RhoA表达.2种细胞同时感染Lm,通过Real-time PCR检测HepG2细胞RhoA上调/下调时培养物中Lm-Hly基因拷贝数,评估Lm数量.结果 HepG2细胞转染p3×FLAG-Myc-CMV 24-RhoA载体后,Western blotting法检测RhoA表达量升高,且48h升高显著,此时HepG2细胞内Lm数量明显低于对照组;HepG2细胞转染siRNA后,Western blotting法检测RhoA表达量降低,且72 h降低显著,此时HepG2细胞内Lm数量明显高于对照组.结论Lm侵入受HepG2细胞RhoA因子调控,主动下调细胞RhoA因子表达可能是Lm侵袭机制之一.