刚地弓形虫Peroxiredoxin多克隆抗体的制备及鉴定
Chinese Journal of Zoonoses（2015）
摘要
目的 原核表达刚地弓形虫过氧化物氧化还原酶(peroxiredoxin,Prx)并制备多克隆抗体.方法 PCR技术扩增弓形虫cDNA中的prx基因,克隆至pET-28a(+)载体,构建prx/pET-28a(+)重组表达载体,转化至大肠埃希菌(E.coli)Rosetta中诱导表达.亲和层析纯化重组Prx蛋白,并制备兔多克隆抗体,蛋白印迹技术对多克隆抗体进行鉴定.结果 成功从弓形虫cDNA中扩增出prx目的基因,构建了prx/pET-28a(+)重组质粒,获得抗Prx重组蛋白的多克隆抗体.蛋白印迹技术检测出弓形虫Prx的特异性条带.结论 重组弓形虫Prx制备的多克隆抗体能检测Prx在弓形虫速殖子表达.
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