法尼醇在促氟康唑耐药白念珠菌凋亡中的作用机制

目的:初步探讨法尼醇促进氟康唑耐药白念珠菌凋亡的可能机制.方法:采用药物浓度梯度法构建氟康唑耐药的白念珠菌株,经鉴定后设为氟康唑耐药组;氟康唑敏感的白念珠菌株作为对照组.在2组中加入终浓度为200 μmol/L的法尼醇,孵育24 h后采用四甲基偶氮唑盐(methylthiazolyl tetrazolium,MTT法)比色法检测加入法尼醇后氟康唑耐药与敏感白念珠菌的增殖情况.应用流式细胞仪、激光共聚焦显微镜等,检测并比较2 组菌株的胱天蛋白酶3(caspase 3)的活化程度、菌株内还原型谷胱甘肽的含量及细胞内活性氧类(reactive oxygen species,ROS)含量,进而比较不同组菌株在细胞凋亡、细胞内氧化还原及氧化应激水平上的差异.结果:与对照组比较,加入法尼醇后,氟康唑耐药的白念珠菌株增殖下降,其差异具有统计学意义(P=0.005 7).氟康唑耐药组白念珠菌内的还原型谷胱甘肽的含量下降,细胞内ROS 含量及胱天蛋白酶3 活性上升,且差异均具有统计学意义(分别 P=0.011、P=0.023、P=0.036).结论:法尼醇通过减少耐药菌株细胞内还原型谷胱甘肽的含量,增加胞内ROS含量,增强胱天蛋白酶3活性,使耐药白念珠菌抗氧化能力下降并促使真菌发生细胞凋亡.