丙型肝炎病毒蛋白对肝细胞RASSF2 mRNA表达的影响及其机制

目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)蛋白NS3、Core、NS5A对肝细胞RASSF2 mRNA表达及RASSF2A启动子甲基化的状态的影响.方法:用RT-PCR检测分别转染NS3、Core、NS5A表达质粒的肝QSG7701细胞(NS3/QSG7701、Core/QSG7701、NS5A/QSG7701)以及正常肝细胞L02中RASSF2 mRNA的表达;用甲基化特异性PCR检测NS3/QSG7701、Core/QSG7701及NS5A/QSG7701细胞中RASSF2A启动子甲基化的状态,以及去甲基化药物5-aza-dC处理后,各细胞RASSF2 mRNA表达情况与生物学行为的变化.结果:与正常肝细胞L02比较,NS3/QSG7701、Core/QSG7701、NS5A/QSG7701细胞中RASSF2 mRNA的表达均明显降低(均P<0.05);3种细胞的RASSF2A启动子均发生完全甲基化.经5-aza-dC处理后,RASSF2 mRNA的表达在NS3/QSG7701和Core/QSG7701细胞中明显上调(均P<0.05),但在NS5A/QSG7701细胞中无明显变化(P>0.05);NS3/QSG7701和Core/QSG770细胞经5-aza-dC处理后,增殖率下降、凋亡率增加(均P<0.05).结论:NS3、Core、NS5A能通过RASSF2A启动子甲基化,且NS5A还通过其他机制降低RASSF2表达,该作用可能参与了HCV相关肝细胞癌的发生.