壳聚糖抑制家兔动静脉内瘘内膜增生的实验研究

目的 观察壳聚糖对家兔颈总动脉-颈内静脉内瘘术后血管内膜增生的影响,探讨Toll样受体4/核因子κB(TLR4/NF-κB)通路对动静脉瘘(AVF)术后血管内膜增生的调控作用.方法28只新西兰大耳白兔被随机分为对照组(n=4)、模型组(n=12)及壳聚糖组(n=12).模型组和壳聚糖组家兔建立家兔颈总动脉-颈内静脉内瘘模型,壳聚糖组动静脉瘘术后静脉端血管及吻合口处涂抹壳聚糖,术后4周、6周及8周分别取AVF静脉端血管组织.观察各组家兔AVF静脉端血管组织的病理改变;免疫组化法检测各组血管组织α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;RT-PCR法检测增殖细胞核抗原(PCNA)和TLR4 mRNA的表达;Western印迹法检测血管组织PCNA、TLR4、髓样分化因子88(MyD88)和NF-κB蛋白的表达.用双因素方差分析法比较各组实验数据的差异.结果 (1)与对照组相比,模型组家兔AVF术后4周静脉端血管内膜增厚,在增生的血管内膜中α-SMA染色阳性,血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖明显.随时间延长,内膜增生改变更为显著变窄,α-SMA表达增加(均P＜0.05).与模型组相比,壳聚糖组内膜增生程度明显减轻,α-SMA表达下降,VSMCs增殖改变减轻(均P＜0.05).(2)与对照组比较,模型组家兔血管组织PCNA、TLR4、MyD88和NF-κB表达量随着AVF时间的延长而增加(均P＜ 0.05);壳聚糖组各指标表达量高于对照组,但明显低于模型组(P＜0.05).结论 壳聚糖可抑制家兔血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖,其机制可能与下调TLR4介导的信号途径减少家兔AVF静脉端血管内膜增生有关.