维甲酸受体介导全反式维甲酸对糖尿病肾病大鼠肾组织细胞增殖与凋亡的影响

目的 探讨维甲酸受体( RAR-α、RAR-β、RAR-γ)介导的全反式维甲酸(ATRA)对糖尿病肾病大鼠肾组织细胞增殖与凋亡的影响及机制.方法 健康雄性SD大鼠30只,随机选10只为空白对照组；链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型,造模成功后随机分为糖尿病模型组(n=10)和ATRA组(n=10).于造模成功第2天起ATRA组大鼠给予ATRA 10 mg·kg-1·d-1灌胃,对照组与糖尿病组均予等体积蒸馏水灌胃.于第8周及第12周观察生化指标及处死各组大鼠,取肾组织行HE染色观察肾脏病理变化；原位末端标记法(TUNEL法)检测各组肾组织细胞凋亡率；间接免疫荧光法检测各组肾组织中维甲酸受体RAR-α、β、γ的表达情况；免疫组化法检测各组肾组织中增殖指标I型胶原(CdI),层粘连蛋白(LN)及凋亡相关因子Smac、caspase-3的蛋白表达.实时定量PCR法检测各组肾组织中Smac、caspase-3 mRNA的表达.结果 与对照组比较,糖尿病组大鼠24h尿蛋白、Scr、BUN、肾质量/体质量比值均显著增加(均P＜0.05),而ATRA组上述指标较糖尿病组减少(均P＜0.05).ATRA组病理改变较糖尿病组减轻.12周时,与对照组比较,糖尿病组细胞凋亡率显著增加(P＜0.01),ATRA组较糖尿病组减少(P＜0.01).间接免疫荧光结果显示,12周时糖尿病组肾组织RAR-α、RAR-β阳性细胞数显著少于对照组(均P＜0.05),而ATRA组较糖尿病组显著增加(均P＜0.01)；各组肾组织中均未见RAR-γ表达变化.免疫组化结果显示,12周时糖尿病组肾组织肾小球系膜区中Col Ⅰ、LN、Smac、caspase-3蛋白的表达显著高于对照组(均P＜0.01),ATRA组较糖尿病组显著减少(均P＜0.01).实时定量PCR结果显示,与对照组比较,糖尿病组Smac、caspase-3 mRNA的表达均显著增多(均P＜0.01),并随时间延长表达增强；ATRA组较糖尿病组显著减少(P＜0.01).结论 全反式维甲酸可能通过其受体介导途径抑制糖尿病肾病肾组织细胞增殖及凋亡,对糖尿病肾病有保护作用.