吸脂组织中脂肪干细胞分离和定向分化的研究

目的 探讨吸脂组织中的干细胞分离和体外诱导分化为表皮样细胞、成骨细胞及脂肪细胞的可能性.方法 通过电动负压吸引获取1例行吸脂手术的30岁女性腹部脂肪组织,酶消化法获取脂肪来源干细胞,体外培养扩增,通过流式细胞仪检测表面抗原的表达.取生长良好的第3代人脂肪来源干细胞,分别应用成表皮诱导培养液(70％培养液A+30％成纤维细胞培养基上清液+10 ng/L表皮生长因子),成骨诱导培养基(DMEM/10％ FBS,0.1μmol/L地塞米松,50 μmol/L维生素C,10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠,100 U/ml青霉素,100 U/ml链霉素)和成脂肪细胞诱导培养基(DMEM+ 10％ FBS+ 500 μmol/L 1-甲基-3-异丁基黄嘌呤+1 μmol/L吲哚美辛)诱导20 d后,分别对成表皮诱导组进行免疫组化检测CK19表达,成骨诱导组进行碱性磷酸酶检测,成脂诱导组进行油红O检测.结果 流式细胞仪鉴定结果示,人脂肪来源干细胞CD44和CD49d为阳性,CD34为阴性.诱导20 d后,成表皮诱导组示免疫组织化学鉴定结构显示有CK19的表达;成骨诱导组示细胞碱性磷酸酶染色阳性;成脂肪细胞诱导组示油红O染色,胞质内脂滴均被染成红色,证实为脂性液体.结论 从吸出的脂肪组织中分离出脂肪来源干细胞,在体外进行了脂肪干细胞的扩增和传代,所分离的脂肪来源干细胞具备多向分化能力.