STEAP3对肝癌细胞增殖能力的抑制作用及机制

目的 探讨前列腺六次跨膜蛋白(STEAP3)对肝癌细胞增殖能力的抑制作用及机制.方法 构建稳定干扰表达STEAP3的肝癌细胞株7721-shSTEAP3、QGY-shSTEAP3(干扰组),及其对照细胞株7721-VECTOR、QGY-VECTOR(对照组).采用RT-PCR检测STEAP3 mRNA的表达,CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期,Western blot检测细胞周期相关蛋白的表达.实验数据比较采用t检验.结果 成功构建稳定干扰表达STEAP3的肝癌细胞株,干扰组7721-shSTEAP3和QGY-shSTEAP3细胞的STEAP3 mRNA表达量分别为(5.10±0.70)×10-3和(0.09±0.02)×10-3,明显低于对照组7721-VECTOR和QGY-VECTOR细胞的(7.80±0.07)×10-3和(7.00±0.21)×10-3(t=-9.60,-57.16;P<0.05).细胞生长曲线显示干扰组7721-shSTEAP3和QGY-shSTEAP3细胞的增殖能力明显强于对照组7721-VECTOR和QGY-VECTOR细胞.细胞周期检测结果显示干扰组7721-shSTEAP3和QGY-shSTEAP3细胞的G0/G1期分别为(55.23±0.51)%、(57.38±0.78)%,明显低于对照组7721-VECTOR和QGY-VECTOR细胞的(68.25±0.28)%、(77.55±0.89)%(t=-7.83,-27.39;P<0.05).干扰组7721-shSTEAP3和QGY-shSTEAP3细胞的细胞周期蛋白(cyclin)D1、细胞周期蛋白依赖激酶(CDK)4蛋白表达水平分别为0.730±0.017、1.090±0.028和0.780±0.063、1.310±0.031,明显高于对照组7721-VECTOR和QGY-VECTOR细胞的0.660±0.059、0.780±0.085和0.530±0.014、0.920±0.024(t=4.47,6.87和12.33,4.89;P<0.05).结论 STEAP3具有抑制肝癌细胞增殖能力的作用,其机制可能与G1期细胞周期阻滞有关.