海姆泊芬-光动力对血管内皮细胞VEGF-Α/MAPK/ERK通路的作用
Chinese Journal of Plastic Surgery(2020)
摘要
目的:研究海姆泊芬-光动力对血管内皮细胞作用的分子学机制。方法:将体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分为4组(细胞数为0.8×10
4/100 μl),光动力处理组(海姆泊芬浓度5 μg/ml,光照剂量为4 J/cm
2)、单独加药组(仅加入5μg/ml海姆泊芬)、单独照光组(仅予以剂量为4 J/cm
2的光源照射)、空白对照组(不加光敏剂不照光),分别检测上述不同组处理24 h后细胞的存活率,用Brdu检测细胞增殖情况,采用实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法、免疫荧光检测上述处理前、后,细胞VEGF-Α/MAPK/ERK通路相关分子的mRNA和蛋白表达水平变化。
结果:应用SPSS18.0软件进行统计学分析,结果以均值±标准差表示,
P<0.05表示差异有统计学意义。与空白对照组相比,光动力处理组血管内皮细胞活性[(0.45±0.08)比(1.02±0.11),
t=12.02,
P<0.05]和细胞增殖水平[(0.42±0.02)比(1.00±0.01),
t=31.20,
P<0.05)]显著下降,细胞中Ras[(0.62±0.02)比(1.05±0.03),
t=10.35,
P<0.05],c-Raf [(0.72±0.04)比(1.00±0.05),
t=7.35,
P<0.05)],Mek[(0.73±0.12)比(1.15±0.04),
t=7.74,
P<0.05],Erk [(0.56±0.11)比(1.02±0.03),
t=5.56,
P<0.05],VEGF-A[(0.34±0.04)比(1.02±0.07),
t=7.59,
P<0.05],VEGFR2[(0.54±0.05)比(1.00±0.03),
t=5.34,
P<0.05]的mRNA表达下调,c-Raf [(0.44±0.02)比(1.02±0.05),
t=46.7,
P<0.05],Mek[(0.72±0.05)比(1.05±0.04),
t=5.35,
P<0.05],Erk [(0.62±0.15)比(1.03±0.03),
t=8.58,
P<0.05]的蛋白磷酸化水平以及VEGF-Α[(0.64±0.03)比(1.03±0.04),
t=21.65,
P<0.05]蛋白表达水平显著下调。
结论:海姆泊芬光动力通过抑制VEGF-Α/MAPK/ERK通路的表达抑制血管内皮细胞活性和增殖水平进而达到抑制血管增生和修复的目的。
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