免疫健全小鼠胰腺癌发生模型的建立及免疫细胞群的变化

目的 建立小鼠胰腺癌发生模型并观察外周血及肿瘤组织中免疫细胞群的变化.方法 利用致癌剂二甲基苯蒽(DMBA)胰腺内原位包埋的方法建立从慢性胰腺炎(chronic pancreatitis,CP)、胰腺导管内瘤变(pancreatic intraepithelial neoplasma,PanIN)到胰腺癌(pancreatic cancer,PC)的发生模型.共建模60只,8周后处死小鼠.随机选择20只存活小鼠,利用流式细胞计数技术(flow cytometry,FCM)检测外周血及胰腺病变组织中7个免疫细胞群的变化.结果 建模8周内共死亡14只(23.3％),存活46只.46只小鼠病变胰腺组织均制备石蜡切片行常规HE染色.46个病变组织中,12例CP(26.1％),11例低级别PanIN (low grade-PanIN,PanIN-1,2,LG-PanIN)(23.9％),9例高级别PanIN(high grade-PanIN,PanIN-3,HG-PanIN)(19.6％)及14例PC (30.4％).随机选择的20只小鼠中,PC及HG-PanIN小鼠外周血中髓系来源抑制细胞(myeloid derived suppressor cells,MDSC)明显高于LG-PanIN及CP小鼠.PC及HG-PanIN小鼠胰腺病变组织中粒细胞、MDSC及M2型肿瘤相关巨噬细胞(tumor associated macrophages,TAM)较LG-PanIN及CP小鼠明显升高,而T淋巴细胞及M1型TAM明显减少.结论 利用DMBA胰腺内原位包埋是建立小鼠胰腺癌发生模型的简便易行的方法.胰腺癌在发生过程中,伴随全身及局部的免疫抑制效应,以病变组织内尤为明显,其中MDSC及M2型TAM可能起到关键作用.