人脱细胞羊膜与家兔骨髓间充质干细胞构建组织工程骨膜的体外实验研究

目的 本项目拟构建生物学活性与人体骨膜相似的组织工程骨膜,即骨髓间充质干细胞(BM－SCs)和取健康足月孕妇羊膜制备人脱细胞羊膜(HAAM)复合而成,体外观察组织工程骨膜的生物活性,并检测其相容性,为体内修复大段骨缺损奠定基础.方法 通过人脱细胞羊膜与家兔骨髓间充质干细胞构建组织工程骨膜的体外实验研究.在HE染色、扫描电镜(SEM)下观察人脱细胞羊膜的结构, MTT描绘出骨髓间充质干细胞在人脱细胞羊膜上的生长情况,钙结节染色检测 (茜素红染色、Von kossa染色)、 ALP(碱性磷酸酶)的检测说明复合而成组织工程骨膜可以产生成骨细胞.结果 ⑴通过物理和化学等方法处理人脱细胞羊膜,其表面无细胞残留,没有破坏其结构和成分,纤维组织呈网状交错分布的三维空间结构;⑵通过对骨髓间充质干细胞在人脱细胞羊膜上的生长曲线检测,说明实验组增殖细胞量比对照组多;⑶家兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)经过成骨诱导液诱导形成成骨细胞,碱性磷酸酶(ALP)和钙素结节是成骨细胞的标志,可以检测出ALP和钙素结节的含量.结论 本研究基于家兔大段骨缺损的治疗,通过建立了家兔骨缺损的模型,体外评价组织工程骨膜的生物学特性,为构建的组织工程骨膜体内修复大段骨缺损奠定了基础.