1，25-二羟基维生素D3通过微管动力学调控表皮细胞迁移的研究

目的:本研究通过HaCaT细胞体外研究观察不同浓度(包括生理浓度)维生素D3(VD3)对表皮细胞迁移的影响并初步探索其迁移调控机制。方法:选用不同浓度VD3(0 nmol/L、10 2 nmol/L、10 nmol/L、10 －1 nmol/L、10 －3 nmol/L及10 －5 nmol/L)的处理HaCaT细胞(上海中国科学院细胞研究所)后，通过划痕实验、活细胞工作站实验、免疫荧光染色实验和免疫印迹实验观察HaCaT细胞迁移运动和检测α-微管蛋白(α-tubulin)的表达并通过 t检验评估组间差异，研究其迁移调控机制。 结果:与对照组比较(VD3浓度0 nmol/L)，高浓度VD3组(10 2、10 nmol/L)HaCaT细胞呈现出更小的迁移范围和速率，α-tubulin表达增高(53.650±5.414和65.370±4.512比76.110±4.386， t＝3.224、2.357， P<0.05；29.140±0.678比32.780±1.311， t＝2.467， P<0.05；18.070±0.792和16.830±1.028比14.830±0.741， t＝3.254、2.336， P<0.05)。生理浓度VD3组(10 －1 nmol/L)HaCaT细胞表现为更大的迁移范围和速率，α-tubulin表达降低(87.010±1.936比76.110±4.386， t＝2.274， P<0.05；41.210±2.044比32.780±1.311， t＝3.472， P<0.05；11.350±0.691比14.830±0.741， t＝3.425， P<0.05)。低浓度VD3组(10 －3、10 －5 nmol/L)HaCaT细胞迁移的范围、速率和α-tubulin表达与对照组比较差异无统计学意义(79.360±6.036和72.370±2.990比76.110±4.386， t＝0.298、0.687， P>0.05；34.150±1.588和33.240±1.055比32.780±1.311， t＝0.666、0.289， P>0.05；14.310±1.115比14.830±0.741， t＝0.403， P>0.05)。 结论:VD3通过微管动力学来调控表皮细胞的迁移，其作用具有双相性和浓度选择性。该研究为进一步揭示局部皮肤VD3应用浓度对伤口愈合作用的细胞和分子机制提供基础。