外源性肺癌肿瘤抑制因子-1基因对人肝癌细胞株7402的侵袭及转移作用机制

目的 观察肺癌肿瘤抑制因子-1(TSLC-1)对人肝癌细胞黏附及运动功能作用的影响,探讨TSLC-1基因在转移中的作用机制.方法 提取正常肝细胞株L02、肝癌细胞低侵袭细胞株MHCC97-L、肝癌细胞高侵袭细胞株MHCC97-H总RNA,反转录合成第1链cDNA,对反转录产物进行荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR).用管家基因β-肌动蛋白(β-actin)的cDNA起始浓度作为参照标准化TSLC-1的cDNA起始浓度,对结果进行单因素方差分析.用重组真核表达载体pcDNA3.1 hisC-TSLC-1转染7402细胞并经过稳定筛选,采用细胞计数法检测TSLC-1基因对7402细胞同质黏附、异质黏附作用的影响,细胞划痕实验检测TSLC-1基因对7402细胞运动能力的影响.结果 正常肝细胞L02、肝癌细胞MHCC97-L、MHCC97-H标准化后的TSLC-1 cDNA起始浓度分别为(33.15±0.05)×103、(9.06±0.03)×103、(6.14±0.09)×103,各细胞株之间TSLC-1表达量差异有统计学意义(P＜0.01).TSLC-1基因转染7402细胞后,同质黏附作用后细胞数[(1301 ±24)个]高于空质粒转染组[(1 279±20)个]和对照组[(987 ±26)个],异质黏附作用后实验组细胞运动迁移能力明显低于空质粒转染组和对照组,组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 TSLC-1基因表达可使人正常肝细胞7402同质黏附作用降低,异质黏附作用降低,运动迁移能力降低.因此,TSLC-1基因具有抑制肝癌细胞发生转移的功能,其机制是改变了细胞基质及细胞间的黏附能力、运动能力,增加TSLC-1基因的表达可能成为一个新的潜在的治疗肝癌的分子靶点.