玻璃化冷冻对小鼠囊胚线粒体DNA及线粒体相关基因表达影响研究

目的 探讨玻璃化冷冻对小鼠囊胚线粒体DNA(mtDNA)和线粒体相关基因mRNA表达的影响.方法 本研究于2015年6月至2016年1月中山大学北校区实验动物中心完成.将180个小鼠囊胚分成玻璃化冷冻组(n=90)和新鲜组(n=90),每组30个胚胎用于mtDNAD环(D-loop)区测序分析;30个胚胎用于实时荧光定量PCR测mtDNA拷贝数;剩余胚胎用于实时荧光定量PCR检测线粒体转录因子A(Tfam)和DNA聚合酶γ(Polg1和Polg2)的mRNA表达,比较2组碱基突变率和mtDNA拷贝数及线粒体相关基因mRNA表达.结果 对照组和玻璃化冷冻组均未发现碱基突变;对照组和玻璃化冷冻组的胚胎mtDNA平均拷贝数分别为2.9×10(s=1.4×105)和3.2×105(s=1.8×105),差异无统计学意义(P＞0.05);两组胚胎的3个线粒体相关基因mRNA表达差异均有统计学意义(P＜0.05),玻璃化冷冻组的3个基因mRNA表达均上调.结论 玻璃化冷冻对小鼠囊胚mtDNA没有影响,但是会引起线粒体相关基因mRNA的表达上调.