人miR-29b过表达慢病毒载体的构建及其对A549细胞迁移的影响

[目的]构建能高效表达人miR-29b的慢病毒载体,研究其对人肺腺癌A549细胞迁移的影响.[方法] PCR扩增miR-29b前体序列,克隆入慢病毒表达载体,测序鉴定.包装好的慢病毒感染A549细胞,流式细胞仪分选后用荧光定量PCR检测miR-29b表达水平,划痕实验观察过表达miR-29b对A549细胞迁移的影响.[结果]测序结果证明成功构建人miR-29b过表达慢病毒载体.miR-29b过表达慢病毒感染效率为88.56％,使A549细胞中miR-29b表达升高2.78倍.与A549细胞相比,稳定过表达miR-29b的A549-miR-29b细胞的迁移能力显著性降低.[结论]成功构建miR-29b过表达慢病毒载体,过表达miR-29b可抑制A549细胞的迁移,为进一步研究miRNA对肿瘤转移的调控作用奠定了基础.