蛋白激酶D抑制剂SD-208对非小细胞肺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨蛋白激酶D抑制剂SD-208对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响.方法 采用5、10、20、30μmol/L SD-208处理非小细胞肺癌细胞A549(设不加SD-208仅添加完全培养基组为对照组),分别在24、48、72h3个不同刺激时间点应用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测A549细胞的吸光值并计算增殖抑制率;膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)和碘化丙啶(PI)双染色法结合流式细胞术检测不同浓度SD-208处理A549细胞24、48 h后的细胞凋亡情况,PI染色法流式细胞仪检测分析不同浓度SD-208处理A549细胞48 h后细胞周期时相分布情况;Western blotting检测不同浓度SD-208处理48 h后的细胞周期蛋白A(Cyclin A)、Cyclin D1、Cyclin E、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)和p16蛋白的表达水平.结果 SD-208可抑制A549细胞的增殖,且呈剂量和时间依赖性(P＜0.05);SD-208处理后A549细胞的凋亡率及G0/G1期细胞比例均高于对照组,而S、G2/M期细胞比例均低于对照组,各浓度间的差异均有统计学意义(P＜0.05);与对照组比较,SD-208处理后的Cyclin D1和CDK4蛋白水平降低,p16蛋白水平升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).SD-208处理对A549细胞Cyelin A和Cyclin E蛋白水平无影响,与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 SD-208可抑制A549细胞增殖并诱导细胞凋亡及G0/G1期阻滞,其机制可能与其影响细胞周期及相关调控蛋白水平有关.