构建STK11基因融合质粒检测其对肺癌细胞迁移能力的影响

目的 构建表达STK11(serine/threonine kinase 11,STK11)基因和报告基因EGFP融合蛋白的重组质粒,并转染肺癌A549和H460细胞株,检测其对肺癌细胞迁移能力的影响.方法 构建重组质粒pEGFP-STK11,双酶切和测序进行鉴定.重组质粒转染A549和H460细胞株,荧光显微镜观察EGFP蛋白表达情况,Western blot检测STKll蛋白表达情况,划痕实验检测其对肺癌细胞迁移能力的影响.结果 酶切和测序结果表明pEGFP-STK11重组质粒构建成功;在转染A549和H460细胞后24h观察到绿色荧光最强;Western blot结果显示STK11蛋白在转染后24 h条带最深;划痕实验显示,转染组细胞迁移距离小于0.9％氯化钠溶液对照组(P＜0.05).结论 成功构建STK11基因重组质粒,并能转染A549和H460细胞,转染后对肺癌细胞迁移能力起一定抑制作用.