HHIP基因去甲基化对HCC827肺腺癌细胞Hedgehog信号通路及增殖影响

[目的]探讨HHIP基因去甲基化后对HCC827肺腺癌细胞Hedgehog信号通路及其增殖的影响.[方法]应用细胞转染技术获得HHIP高表达的HCC827细胞,并将HCC827细胞分为空白对照组、过表达转染组及5-氮杂-2'脱氧胞苷(5-Aza-2'-de-oxycytidine,5-Aza-CdR)处理组.采用甲基化特异性聚合酶链式反应和亚硫酸盐测序PCR检测5-Aza-CdR处理前后HCC827细胞HHIP基因启动子区甲基化状况,应用Real-time qPCR及Western-blot方法检测各组细胞的Hedgehog信号通路相关基因及细胞周期素D2(CCND2)mRNA及蛋白表达水平,CCK8分析细胞增殖的变化.[结果]HHIP基因去甲基化或过表达质粒转染后,HHIP基因表达明显上调,其Hedgehog信号通路相关基因PTCH、SHH基因表达均明显下调,CCND 2表达上调(P均＜0.01),HCC827增殖能力出现降低(P＜0.01).[结论]高甲基化抑癌基因HHIP基因去甲基化后,可抑制HCC827腺癌细胞Hedgehog信号通路的活化并抑制其增殖,这可能与其Hedgehog信号通路负性调节因子HHIP基因恢复表达相关.