miR-377-5p通过下调HIF-1α及其相关VEGF信号通路抑制肝细胞癌HepG2细胞的增殖和侵袭

Chinese Journal of Cancer Biotherapy(2020)

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摘要
目的:探讨miR-377-5p与缺氧诱导因子-1 α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)的靶向关系以及通过控血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)信号通路对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞增殖、侵袭和EMT的调控作用.方法:qPCR检测35例人HCC组织及癌旁组织标本中miR-377-5p的表达水平.将HepG2细胞分为对照组、mimic NC组、miR-377-5pmimic组,qPCR检测转染效率;EdU染色、Transwell和Western blotting (WB)检测miR-377-5p过表达对HepG2细胞增殖、侵袭及其增殖相关蛋白Ki-67、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)标志蛋白E-cadherin、N-cadherin表达的影响;qPCR、WB检测miR-377-5p过表达对HepG2细胞中,缺氧诱导因子-1 α(hypoxia inducible factor-1 α,HIF-1α)表达的影响.荧光素酶报告基因实验验证miR-377-5p与HIF-1 α基因的靶向关系.结果:HCC组织中miR-377-5p表达水平较癌旁组织降低(P<0.01).与对照组相比,miR-377-5p mimic组HepG2细胞中miR-377-5p水平明显升高,细胞的增殖、侵袭能力降低(均P<0.01),EMT、N-cadherin表达水平降低(均P<0.01)而E-cadherin表达水平显著升高(P<0.01);miR-377-5p mimic组中HIF-1 αmRNA和蛋白表达水平均降低(P<0.01或P<0.05).miR-377-5p靶向抑制HIF-1α基因表达,并抑制VEGF通路的激活(均P<0.05).结论:miR-377-5p通过靶向抑制HIF-1α基因表达和下调VEGF信号通路从而抑制HepG2细胞的增殖、侵袭和EMT.
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