盐霉素对人黑色素瘤M21细胞增殖及自噬流的影响

目的 探讨盐霉素对人黑色素瘤M21细胞增殖及自噬流的影响.方法 采用MTS法检测细胞生存率,计算半数抑制浓度IC50值.观察给药后细胞形态学变化.采用流式细胞仪检测细胞的凋亡率. Western blot检测给药后M21细胞内自噬相关蛋白LC3B表达情况.透射电镜下观察给药后M21细胞内是否有自噬小体产生. Western blot和免疫荧光检测p62蛋白水平和定位变化.结果 盐霉素对人黑色素瘤M21细胞具有明显的增殖抑制作用,IC50值为(1. 38 ± 0. 18) μM.给药后细胞增殖速度减慢,同时细胞中出现明显的空泡.盐霉素不能促进细胞发生凋亡,但能使细胞内LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ的比值逐渐增加.在透射电镜下观察到自噬小体的增多与堆积.盐霉素作用后p62蛋白水平些许升高,逐渐在胞质内聚集成团状,表明自噬流被抑制.结论 盐霉素能够抑制人黑色素瘤M21细胞的增殖,其机制可能与诱导自噬小体增多、抑制自噬流有关.