高压氧通过上调Cystatin C增强胚胎大鼠皮层神经元对氧糖剥夺的耐受

目的:探讨胱抑素C(Cys C)在高压氧(HBO)促进胚胎大鼠皮层原代神经元对糖氧剥夺(OGD)耐受过程中的作用.方法:取孕18 d SD大鼠胎鼠大脑皮质进行原代神经元培养.实验分为对照组(control)、OGD组(OGD)、HBO预处理组(HBO+OGD)、Cys C处理组(Cys C+OGD)和siRNA处理组(Cys C-siRNA +OGD),于培养后第10 d给予HBO预处理24h,制备氧糖剥夺(OGD)模型,向细胞培养液中补充外源性Cys C或特异性siRNA来增加或下调神经元中Cys C水平,利用乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒检测细胞死亡.采用Western Blot的方法检测各组细胞内自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和Beclin-1的表达.结果:HBO预处理可减轻大鼠皮层原代神经元OGD后的细胞死亡,同时上调Cys C、LC3-Ⅱ及Beclin-1的表达.Cys C-siRNA能够显著抑制HBO预处理对神经元的保护作用,并抑制LC3-Ⅱ及Beclin-1的表达;外源性Cys C具有与Cys C-siRNA相反的作用.结论:Cys C是HBO预处理诱导神经保护效应的重要分子,其内在机制可能为HBO预处理可通过促进Cys C表达,上调LC3-Ⅱ及Beclin-1的表达,减轻神经损伤.