高糖环境下大鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化和线粒体自噬相关性的研究

目的:探讨在高糖环境下大鼠骨髓间充质干细胞线粒体自噬和成骨分化的相关性.方法:将rBMSCs在高糖环境下(葡萄糖浓度分为5.5mM低糖组、30mM高糖组和甘露醇等渗组)成骨诱导7天,通过Western Blot实验检测LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、ALP、OPN蛋白的表达情况;通过RT-PCR实验检测LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、ALP、OPN基因的表达情况;激光共聚焦共定位实验比较线粒体标记物Mito-tracker和自噬溶酶体标记物LC3的共定位情况,分析高糖环境下rBMSCs成骨分化和线粒体自噬的相关性.结果:30mM高糖组能显著抑制rBMSCs的增殖,与5.5mM组相比,30mM高糖组内自噬标记蛋白LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ(P＜0.01)、LC3 Ⅱ(P＜0.05)以及成骨标记蛋白ALP(P＜0.01)和OPN(P＜0.05)的表达下降;自噬基因LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ(P＜0.05)和成骨基因ALP、OPN(P＜0.001)表达水平降低;Mito-tracker和LC3在5.5mM组定位情况(PCC=0.52)优于30mM组(PC C=0.26).结论:高糖环境能够显著抑制rBMSCs的成骨分化和线粒体自噬能力,两者的变化可能存在相关性.