水蛭活性肽的纯化工艺

目的:对水蛭活性肽进行纯化,并对水蛭活性肽进行树脂纯化条件考察.方法:采用DA201-C大孔吸附树脂进行极性分离,后经D201阴离子交换树脂进行电荷分离,最终得到纯化的水蛭活性肽组分.结果:DA201-C大孔树脂,上样肽浓度20 mg·mL-1,流速1.0 BV·h-1,依次用25％乙醇、50％乙醇和75％乙醇溶液洗脱,各洗脱部位得率及活力较高,但总体活性成分被分散,以上各洗脱部位经D201离子交换树脂,pH4.0,上样肽浓度30 mg·mL-1,流速3.0BV·h-1,分别用2.5％氯化钠的25％乙醇、2.5％氯化钠的50％乙醇、2.5％氯化钠的75％乙醇溶液洗脱,2.5％氯化钠的25％乙醇和2.5％氯化钠的50％乙醇洗脱部位有明显的抗凝活性,经过分析性RP-HPLC验证后,基线平稳,各组分分离度良好.结论:经DA201-C大孔树脂和D201离子交换树脂纯化后的水蛭活性肽,2.5％氯化钠的25％乙醇和2.5％氯化钠的50％乙醇洗脱部位活力较高,分离度好.