HMGN5基因敲除对人膀胱上皮癌细胞顺铂化疗敏感性的影响

目的 探讨HMGN5基因敲除对人膀胱上皮癌细胞顺铂化疗敏感性的影响.方法 采用不同浓度CDDP(0、1、2、4,8、16 μg/ml)处理人UBC细胞系,采用Western blot、菌落形成、细胞侵袭、细胞凋亡及Hoechst 33342染色法评价HMGN55蛋白敲除对UBC细胞CDDP敏感性的影响,同时分析HMGN5基因参与到UBC细胞CDDP治疗环节可能分子机制.结果 UBC细胞株5637、t24及UM-UC-3中HMGN5蛋白表达,其中5637细胞系HMGN5蛋白水平最高,而UM-UC-3细胞中最低(P＜0.05);5637细胞系对CDDP敏感性显著低于其他两种(P＜0.05),且UM-UC-3细胞系敏感性最高;UBC细胞系HMGN5敲除后P-Akt表达显著下降(P＜0.05);CDDP处理后P-Akt活性亦随之降低(P＜0.05);CDDP处理还可下调VEGF-C和SLUG表达,上调E-Cad表达(P ＜0.05);5637细胞HMGN5基因敲除后早期凋亡率显著提高,而加入IGF-1可逆转这一过程(P＜0.05);与阴性对照组和IGF-1治疗组相比,HMGN5敲除组凋亡核百分比显著升高(P＜0.05);与对照组相比,HMGN5基因敲除显著下调P-AKT和VEGF-C表达,上调E-Cad、细胞色素C、裂解半胱天冬酶-3、裂解PARP表达(P＜0.05);而添加IGF-1可逆转以上蛋白质表达变化(P＜0.05).结论 HMGN5可能是顺铂治疗潜在靶点,抑制HMGN5基因有助于增加UBC细胞化疗敏感性,这一作用主要通过干扰PI3K/Akt信号通路实现.