甲氨蝶呤对C反应蛋白在类风湿关节炎中致炎作用的影响

目的：了解甲氨蝶呤（MTX）对C反应蛋白（CRP）在体外培养类风湿关节炎（RA）滑膜成纤维细胞（FLS）中的致炎作用的影响。方法体外培养人RAFLS和健康人滑膜成纤维细胞（HFLS）。分别设立空白对照组、CRP刺激组、MTX加CRP作用组，用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组白细胞介素（IL）-6、基质金属蛋白酶（MMP）-3、肿瘤坏死因子（TNF）-α的mRNA和蛋白表达。免疫印迹法检测各组磷酸化P65、IκB的表达。结果 CRP能明显上调RAFLS表达的IL-6、MMP-3、TNF-α的mRNA和蛋白表达水平（P＜0．01），且比HFLS明显升高（P＜0．05），提示CRP有促炎作用。 CRP能使RAFLS的磷酸化P65水平明显增加，IκB明显减少，提示CRP能活化核因子（NF）-κB通路。在IL-1β诱导下，RAFLS中CRP的mRNA和蛋白表达明显升高，而MTX能降低RAFLS中CRP的表达（P＜0．05）。 MTX能拮抗CRP上调RAFLS表达IL-6、MMP3、TNF-α的mRNA和蛋白表达水平的作用（P＜0．05），能拮抗CRP增加RAFLS的磷酸化P65水平和降解IκB的作用（P＜0．05）。结论 MTX可以通过降低RAFLS表达的CRP，拮抗CRP活化NF-κB通路、促进IL-6、MMP3、TNF-α等炎症因子产生的作用，从而达到治疗控制RA炎症的作用。