重组白介素-15融合蛋白成像毛细管等电聚焦电泳谱图分析

目的 通过对成像毛细管等电聚焦电泳谱图分析探讨重组白介素-15融合蛋白糖链类型和构成比例.方法 通过建立相应的数学模型,分析重组白介素-15融合蛋白的等电聚焦电泳检测谱图、去唾液酸等电聚焦电泳检测谱图和去N糖链等电聚焦电泳检测谱图,并根据各峰面积和等电点的相互关系,用最小二乘法进行组成拟合分析,明确峰面积和等电点分布相互关系.结果 确认间隔1个峰模型的合理性,并根据该模型获得一系列基础相关数据,包括该蛋白的表观m值25.53个基准(R);该蛋白的表现n值28.83R;唾液酸的表现m值0.86(0.855)R,表观n值0.12(0.119)R;N乙酰氨基葡萄糖(未区分与N乙酰半乳糖胺的不同)表观n值0.06(0.061)R;去N糖链后形成的羧基表现m值0.19(0.186)R.该蛋白质糖构成的相关信息,包括唾液酸化度为;摩尔比约1.83;蛋白原型占比约8.3％、合N糖链单修饰占比约19.8％、含N糖链双修饰约28.4％、含N糖链三修饰占比约23.7％;带唾液酸O糖链修饰占比19.8％;主要糖型为G0(海藻糖F)、G1(F)、G2(F)、G1A1(F)和G2A1(F).结论 糖链的结构复杂,但也有一定重复性和规律性,希望通过本实验的研究,可以快速勾勒出糖蛋白糖链轮廓,增进对耱蛋白认识和对蛋白相互作用的研究.