下调miR-205-5p增强鼻咽癌细胞HNE1/DDP对顺铂诱导凋亡的敏感性

探讨下调miR-205-5p增强鼻咽癌耐药细胞HNE1/DDP对顺铂诱导凋亡的敏感性及其可能机制.qRT-PCR检测HNE1、HNE 1/DDP细胞中miR-205-5p的表达差异及HNE1/DDP细胞转染miR-205-5p抑制剂后miR-205-5p的变化;MTT法检测顺铂(DDP)和miR-205-5p抑制剂对HNE1/DDP或HNE1细胞的增殖抑制作用;PI单染流式技术检测细胞凋亡情况;DAPI染色观察细胞核的形态;Western blot检测Bax、Bak、Mcl-1、Bcl-2蛋白的表达水平.结果 显示,相比于HNE1细胞,HNE1/DDP高表达miR-205-5p,转染miR-205-5p抑制剂后其表达明显下降.下调miR-205-5p可显著提高HNE 1/DDP细胞对顺铂的敏感性(P＜0.05).PI单染结果显示,转染miR-205-5p抑制剂可增强HNE1/DDP细胞对顺铂的诱导凋亡作用.miR-205-5p抑制剂联合DDP(8 μmol·L-1)作用HNE 1/DDP细胞24 h的凋亡率为(28.93±2.50)％,相比单用miR-205-5p抑制剂(9.83±1.31)％或DDP的凋亡率(10.83±1.70)％显著升高(P＜0.05).联合作用组细胞表现为细胞核明显皱缩浓集呈碎片状.miR-205-5p抑制剂与DDP合用能上调Bax的表达和下调Bcl-2的表达.提示下调miR-205-5p可增强HNE 1/DDP细胞对DDP的敏感性,其作用机制可能是促凋亡蛋白Bax的升高和抗凋亡蛋白Bcl-2的下降.