广地龙饮片的HPLC特征图谱及5个核苷类成分的测定

目的:建立广地龙饮片及其2种常见伪品的HPLC特征图谱并测定其中尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、腺苷、肌苷的含量,为广地龙饮片的真伪鉴别和质量控制提供参考.方法:采用Thermo TSK-GELC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.1％甲酸水溶液-甲醇(99∶1)为流动相,等度洗脱40 min,流速为1.0 mL·min-1,检测波长260 nm,柱温30℃,进样量10 μL.采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”建立指纹图谱并进行相似度评价,并对尿嘧啶,次黄嘌呤,黄嘌呤,腺苷和肌苷的含量测定进行方法学考察.结果:建立了广地龙饮片及其伪品的特征图谱,正品(参环毛蚓)中标定了7个共有峰,伪品大腔蚓和暗孔远盲蚓中均标定了8个共有峰.对不同来源的广地龙饮片及其伪品中5个核苷成分进行含量测定.尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、腺苷、肌苷线性范围分别为3.40～170、4.40～220、5.00～250、3.40～170、4.20～210μg·mL-1,线性关系良好(r≥0.999 9);重复性和稳定性的RSD均＜3.0％,平均加样回收率在95.5％～107.0％之间.18批广地龙饮片中均未检测到腺苷,尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、肌苷含量分别为0.021～0.408、0.309～6.133、0.825～4.714和1.413～23.382 mg·g-1.结论:所建立特征图谱专属性强,结合5个主要成分含量测定,能够为广地龙饮片的真伪鉴别和质量控制提供科学依据.