HPLC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中26种胆汁酸

目的:建立HPLC-MS/MS法同时定量检测大鼠血浆中26种胆汁酸的浓度.方法:大鼠血浆采用蛋白沉淀法处理,26种胆汁酸使用Symmetry C18色谱柱分离.流动相为水(0.1％甲酸+10 mmol· L-1乙酸铵)-甲醇(0.1％甲酸+10 mmol·L-1乙酸铵),梯度洗脱,流速0.15 mL· min-l,检测时间50 min.检测系统采用电喷雾离子源,负离子模式.结果:26种胆汁酸线性关系良好且色谱峰互不干扰,定量下限为0.010～0.200 μmol·L-1,日内、日间回收率均在85.9％～ 113.8％之间,精密度均在2.0％～13.3％之间,提取回收率在65.7％～104.5％之间.正常SD大鼠血浆中26种胆汁酸浓度范围为0.0192～2.83 μmol· L-1,其中猪去氧胆酸(HDCA)、去氧胆酸(DCA)、胆酸(CA)、甘氨胆酸(GCA)、β-鼠胆酸(β-MCA)和甘氨脱氧胆酸(GDCA)是SD大鼠血浆中的主要胆汁酸.结论:该方法准确有效,灵敏度高,操作简单,可在50 min内同时检测大鼠血浆中26种胆汁酸,并可为其他生物基质中的胆汁酸检测方法提供参考.