UPLC-MS/MS法测定人尿液中替芬泰及其代谢物浓度

目的:建立人尿液中替芬泰(Y101)及其代谢物M8和M9浓度的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法并用于Y101在人尿液中排泄的研究.方法:采用甲醇沉淀法进行尿液前处理并稀释后分析,色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18(50mm×2.1 mm,1.7 μm),流动相为5 mmol· L-1醋酸铵水溶液(含0.1％甲酸)-甲醇=57∶43(v∶v),流速为0.3 mL· min-1,柱温为40℃,进样量为2 μL.质谱采用电喷雾离子源(electrospray ionization,ESI),正离子模式,多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)方式.Y101、代谢物M8、M9和帕拉米韦(内标)的监测离子对为m/z 490.1→339.0,m/z 357.2→105.2,m/z 373.1→105.1和m/z 329.1→270.2.结果:该方法选择性良好,人尿液中原型Y101、代谢物M8和M9分别在0.020 0～20.0,0.200～ 100和0.030 0～10.0 μg· mL-1范围内线性良好,平均回收率分别为95.9％～102.2％,97.3％ ～99.3％和98.1％ ～98.5％,内标归一化基质因子分别为0.95 ～ 1.04,0.98 ～ 1.02和0.99 ～1.00,批内、批间精密度均＜15％.同时,对Y101、代谢物M8和M9浓度分别为150.0,400.0和30.00 μg· mL-1的样本采用空白基质进行10倍稀释的稀释可靠性考察,结果表明分析物准确度为92.0％～107.0％,精密度＜5％.结论:所建立的UPLC-MS/MS分析方法专属性强、灵敏度高、重现性好,适用于人尿液样本Y101及其代谢物M8和M9的定量分析.