基于CRISPR/Cas9系统的单碱基基因编辑技术及其在医药研究中的应用

成簇规律间隔短回文重复序列及其相关基因9(CRISPR/Cas9)系统的基因编辑需要依赖双链DNA断裂和低效的同源重组,这使其在精准基因编辑中效率不高.单碱基基因编辑技术通过将Cas9蛋白与胞苷脱氨酶或腺苷脱氨酶形成融合蛋白,并通过单链向导RNA(sgRNA)与靶序列的互补配对和Cas9蛋白对前间区序列邻近基序(PAM)的识别,在不产生双链DNA断裂的情况下在靶位点编辑窗口内进行碱基C→T或A→G的单碱基编辑,实现了基因组中G:C与A:T的互换.单碱基基因编辑技术简便高效,是生命科学研究领域应用的热点技术.本文综述了单碱基基因编辑技术的基本概况、筛选优化、医药研究中的应用以及目前存在的主要问题,以期为相关领域的进一步研究提供借鉴.