GATA-4基因促进5-氮杂胞苷诱导的骨髓间充质干细胞向心肌分化

目的 探讨转染外源性基因GATA-4促进5-氮杂胞苷(5-azacytidine,5-aza)诱导的大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向心肌细胞分化的作用.方法 全骨髓法分离大鼠BMSCs,按照1∶2.5比率用脂质体法将GATA4(pVP22-GATA-4/myc-His)质粒瞬时转染第3代BMSCs,转染72 h后加入10 μmol/L 5-aza诱导24 h,观察细胞形态变化.转染48 h后,免疫细胞化学检测GATA-4、myc的表达.于诱导后28 d免疫细胞化学及免疫印迹法检测GATA-4、心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)的表达情况,以鉴定细胞分化.结果 转染72 h后,免疫细胞化学结果表明实验组可见GATA-4、myc表达.诱导后28 d应用免疫细胞化学及免疫印迹法检测结果显示,实验组GATA-4、cTnT表达显著高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 外源表达GATA4能够促进5-aza诱导的BMSCs向心肌分化.