白藜三醇对TGF-β诱导的心肌成纤维细胞增殖及相关微小RNA的影响

目的:研究白藜三醇(resveratrol,RSV)对转化生长因子β(TGF-β)诱导的SD新生大鼠心肌成纤维细胞增殖及相关microRNA表达的影响,探讨RSV在microRNA水平上抑制TGF-β诱导的成纤维细胞增殖的可能机制.方法:采用胰酶和胶原酶双酶法及差速贴壁法分离培养新生大鼠心肌成纤维细胞,传代培养,实验中采用2～3代细胞.实验分为对照组、TGF-β(5 ng·ml-1)组及TGF-β(5 ng·ml-1)+RSV(50μmol·L-1)组3组.CCK-8法检测RSV对心肌成纤维细胞的最佳药物作用浓度、作用时间;CCK-8法检测对照组、TGF-β组及TGF-β+RSV组各组心肌成纤维细胞增殖情况;实时荧光定量PCR(qPCR)TaqMan探针法检测各组细胞miR-34a、miR-181a、miR-17的差异性表达.结果:与对照组相比,TGF-β组心肌成纤维细胞增殖明显增加(P<0.001),与TGF-β组相比,TGF-β+RSV组心肌成纤维细胞增殖明显减少(P<0.001);与对照组相比,TGF-β组miR-34a、miR-181a及miR-17显著上调,分别为P<0.01、P<0.001、P<0.001;与TGF-β组相比,TGF-β+RSV组miR-34a、miR-181a及miR-17显著下调,分别为P<0.01、P<0.01、P<0.001.结论:RSV可抑制TGF-β诱导的心肌成纤维细胞的增殖,这一过程可能是通过下调miR-34 a、miR-181 a、miR-17实现的.