PTD-p53融合蛋白调控肝癌细胞HepG2增殖和凋亡的研究

目的 探究PTD-p53融合蛋白进入肝癌细胞,调控HepG2细胞增殖与凋亡的生物学功能.方法 构建pET28a-PTD-p53原核重组载体,表达具有进入细胞能力的PTD-p53融合蛋白.SDS-PAGE电泳检测融合蛋白质量分数和特异性;蛋白质印迹技术检测融合蛋白跨膜能力;细胞形态学观察和流式细胞仪分析PTD-p53融合蛋白对肝癌细胞HepG2凋亡水平的影响;细胞克隆实验探讨PTD-p53融合蛋白对HepG2细胞的增殖调控.结果 大肠杆菌表达的PTD-p53融合蛋白主要位于包涵体中,复性后的PTD-p53能够以浓度梯度方式进入HepG2细胞,细胞形态学观察和流式细胞仪检测结果表明,PTD-p53融合蛋白处理促进HepG2细胞凋亡;细胞克隆实验显示终质量浓度为1 mg/L或2.5 mg/L的PTD-p53处理HepG2细胞,以剂量依赖方式抑制HepG2细胞克隆形成.结论 PTD-p53融合蛋白可以进入肝癌细胞,促进HepG2细胞凋亡,抑制细胞增殖,为进一步体内验证PTD-p53融合蛋白抑制肿瘤的效果奠定基础.