类鼻疽伯克霍尔德菌Ⅲ型分泌系统蛋白BsaL的制备和免疫反应性分析

目的 构建表达重组的类鼻疽伯克霍尔德菌Ⅲ型分泌系统结构蛋白BsaL的大肠工程菌,制备高纯度、高质量的重组BsaL蛋白样品,探讨其作为类鼻疽菌检测的候选抗原的可行性.方法 基因工程技术构建表达重组BsaL蛋白的大肠工程菌,通过亲和层析、凝胶过滤层析等纯化方法得到高纯度的BsaL蛋白.包被BsaL蛋白于96孔板,分析其用于检测临床类鼻疽菌株的敏感性和特异性.结果 成功构建了表达重组BsaL蛋白的大肠工程菌,诱导、表达及纯化后得到高纯度(＞99％)、高浓度(20 mg/mL)的重组BsaL蛋白.该蛋白在类鼻疽菌检测方面表现出较好的灵敏度(85％)和特异性(89％).结论 成功表达了重组的BsaL蛋白,获得了高纯度的BsaL蛋白样品,在类鼻疽菌的诊断方面展示出较好的应用价值.