1800 MHz射频电磁场通过瞬时受体电位C通道影响原代大鼠皮层神经元突起生长

目的 研究1 800 MHz射频电磁场(radio frequency electromagnetic field,RF-EMF)对原代培养皮层神经元突起生长的影响,并通过瞬时受体电位C通道介导的钙内流,探讨RF-EMF对突起生长影响的机制.方法 将原代培养皮层神经元(primarily cultured cortical neurons,PCCNs)用随机数表法分为4组:假暴露(Sham)、Sham+SKF-96365、辐照组(RF)和RF+SKF-96365组.使用sXc-1800辐照系统,1 800 MHz频率talk模式,5 min开10 min关,比吸收率为4 W/kg,辐照组辐照时间分别为12、24 h和48 h.SKF-96365干预处理是在维持培养基中加入SKF-96365(5μmol/L)后与假暴露组、RF组进行相同的处理.辐照结束后即刻进行以下指标检测:①细胞活力(CCK-8法)和LDH释放;②TRPC1、TRPC3蛋白表达(Western blot);③钙库操纵性钙内流变化(store-operated calcium entry,SOCE)(激光共聚焦显微镜);④神经元突起总长度、初级突起数和分支数(Tuj-1免疫荧光染色).结果 RF组细胞活力和LDH释放与相应Sham组相比差异均无统计学意义(P＞0.05).与Sham组比较,RF组辐照24 h后,TRPC1和TRPC3蛋白表达分别降低24％和23％,SOCE下降54％,辐照48 h引起PCCNs突起总长度、初级突起数和分支数分别下降20％、12％、31％,以上变化均有统计学意义(P＜0.05).Sham+SKF-96365组SOCE下降24％,突起总长度、初级突起数、分支数分别下降10％、12％、24％,与Sham组比较均有统计学意义(P＜0.05),而RF+ SKF-96365组SOCE和突起总长度、突起数、分支数的变化与RF组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 RF-EMF可引起原代皮层神经元突起长度、初级突起数和分支数减少,该效应可能与TRPC1和TRPC3通道蛋白表达降低和TRPC通道介导的钙信号减弱有关.