成纤维细胞生长因子受体FGFR1真核表达质粒的构建及其在HEK293T细胞的表达

目的 建立一个有效表达FGFR1的真核系统.方法 从人胎盘组织提取总RNA,通过RT-PCR扩增得到FGFR1基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1上,构建成pcDNA3.1-FGFR1质粒表达载体,并在HEK293T细胞重组表达;将pcDNA3.1-FGFR1质粒转染HEK293T细胞,通过免疫印迹和免疫荧光检测FGFR1在细胞中的表达情况.结果 扩增的FGFR1序列与数据库一致;通过构建表达载体和转染细胞实现了FGFR1 cDNA在HEK293T细胞膜上的表达.结论 成功扩增出FGFR1 cDNA基因,经过转染HEK293T细胞,实现了FGFR1在HEK293T细胞的高效表达.